Avaliação da segurança do processamento de fresas intramedulares flexíveis para cirurgia ortopédica / Safety assessment of reprocessing of flexible intramedullary bone reamers for orthopedic surgery / Evaluación de la seguridad del procesamiento de fresas intramedulares flexibles para cirugía ortopédica

Objetivos: Avaliar a eficácia de um procedimento operacional padrão para limpeza de fresas intramedulares flexíveis, bem como o alcance da esterilidade, e evi-denciar a citotoxicidade da sujidade residual de uma fresa flexível utilizada na prática assistencial. Métodos: Fresas intramedulares flexíveis foram pesadas antes do processamento, após contaminação desafio e depois da limpeza. Elas foram contaminadas com Soil Test™, suspensão de Geobacillus stearothermophilus, na concentração de 106 UFC/mL, e farinha de osso bovino. Após processamento, as amostras foram incubadas em meio de cultura por 21 dias. A sujidade residual de uma fresa utilizada na prática foi submetida ao teste de citotoxicidade in vitro. Resultados: As amostras, embora esterilizadas, apontaram acúmulo de sujidade e o processamento foi ineficaz. A sujidade residual apresentou efeito citotóxico. Conclusão: Recomenda-se que o design flexível das fresas seja descontinuado pela insegurança no processamento.

Objectives: To assess the efficacy of a standard operational procedure to clean flexible intramedullary bone reamers, as well as the sterilization level, and to show the cytotoxicity of the residual dirtiness of a flexible reamer used in care practice. Methods: Flexible intramedullary bone reamers were weighed before processing, after challenge contamination and after cleaning. They were contaminated with the Soil Test™, Geobacillus stearothermo-philus suspension, in the concentration of 106 cfu/ml, and bovine bone flour. After processing, the samples were inoculated into a culture medium and incubated for 21 days. Residual dirtiness of a flexible intramedullary bone reamer used in practice was submitted to in vitro cytotoxicity test. Results: Despite being sterilized, the samples indicate to accumulated dirtiness and the processing was inefficient. Residual dirtiness presented a cytotoxic effect. Conclusion: It is recommended that the flexible design of reamers is discontinued by the lack of safety of reprocessing.

Objetivos: Evaluar la eficacia de un procedimiento operacional estándar para limpieza de fresas intramedulares flexibles, así como el alcance de la esterilidad, y evidenciar la citotoxicidad de la suciedad residual de una fresa flexible utilizada en la práctica asistencial. Métodos: Fresas intramedulares flexibles fueron pesadas antes del procesamiento, tras contaminación desafío y después de la limpieza. Fueron contaminadas con Soil Test™, suspensión de Geobacillus stearothermophilus, en la concentración de 106 UFC/mL, y harina de hueso bovino. Tras el procesamiento, las muestras fueron incuba-das en medio de cultura por 21 días. La suciedad residual de una fresa utilizada en la práctica fue sometida al test de citotoxicidad in vitro. Resultados: Las muestras, aunque esterilizadas, apuntaron acumulación de suciedad y el procesamiento fue ineficaz. La suciedad residual presentó efecto citotóxico. Conclusión: Se recomienda que el design flexible de las fresas sea descontinuado por la inseguridad en el procesamiento.

The impact of the use of different types of gloves and bare hands for preparation of clean surgical instruments / O impacto do uso de diferentes tipos de luvas e das mãos nuas no preparo do instrumental cirúrgico limpo / El impacto del uso de diferentes tipos de guantes y de las manos desnudas en la preparación del instrumental quirúrgico limpio

ABSTRACT Objectives: to determine if there are differences on the safety of the preparation of clean surgical instruments using different types of gloves and bare hands and evaluate the microbiological load of these preparations without gloves. Method: laboratory procedure with a pragmatic approach, in which the samples were handled with different types of gloves and bare hands. In addition, cytotoxicity assays were carried out by means of the agar diffusion method. Further samples were subjected to microbiological analysis after being handled without gloves. Results: none of the samples showed cytotoxic effect. All microbiological cultures showed growth of microorganisms, but no microorganism has been recovered after autoclaving. Conclusion: there were no differences in the cytotoxic responses regarding the use of different types of gloves and bare hands in the handling of clean surgical instruments, which could entail iatrogenic risk. It is noteworthy that the use of gloves involves increase in the costs of process and waste generation, and the potential allergenic risk to latex.

RESUMO Objetivos: determinar se existe diferenças na segurança do preparo de instrumentais cirúrgicos relacionada ao uso de distintos tipos de luvas e das mãos nuas no preparo, e avaliar a carga microbiológica destes preparados sem luvas. Método: experimento laboratorial com abordagem pragmática, onde amostras foram manipuladas com diferentes tipos de luvas e com as mãos nuas, elaborado teste de citotoxicidade por meio da difusão em ágar. Outras Amostras sofreram análise microbiológica após serem manipuladas sem luvas. Resultados: nenhuma das amostras apresentou efeito citotóxico. Todas as culturas microbiológicas apresentaram crescimento de microrganismos, embora nenhum microrganismo tenha sido recuperado após a autoclavação. Conclusão: não houve diferenças nas respostas citotóxicas relacionadas ao uso de diferentes tipos de luvas e das mãos nuas na manipulação do instrumental cirúrgico limpo que sinalizasse risco de iatrogenia. Ressalta-se que o uso de luvas implica em aumento dos custos do processo e da geração de resíduos, além do potencial risco alergênico ao látex.

RESUMEN Objetivos: determinar si existen diferencias en la seguridad de la preparación del instrumental quirúrgico relacionadas con el uso de diferentes tipos de guantes y de las manos desnudas y evaluar la carga microbiológica de estos preparados sin guantes. Método: experimento de laboratorio con enfoque pragmático, en el que las muestras fueron manejadas con diferentes tipos de guantes y las manos desnudas. Además, un ensayo de citotoxicidad se llevó a cabo mediante el método de difusión en agar. Otras muestras fueron sometidas a análisis microbiológico después de haber sido manipuladas sin guantes. Resultados: ninguna de las muestras presentó efecto citotóxico. Todos los cultivos microbiológicos mostraron crecimiento de microorganismos, pero ningún microorganismo ha sido recuperado después de la esterilización en autoclave. Conclusión: no hubo diferencias en las respuestas citotóxicas con respecto al uso de diferentes tipos de guantes y de las manos desnudas en el manejo del instrumental quirúrgico limpio, lo que podría conllevar riesgo de yatrogenia. Es de destacar que el uso de guantes implica un aumento de los costos del proceso y la generación de residuos, además del potencial riesgo alergénico al látex.

O impacto do último enxágue na citotoxicidade de produtos críticos passíveis de processamento / Impacto del último enjuague en la citotoxicidad de productos críticos pasibles de procesamiento / The impact of the final rinse on the cytoxicity of critical products submitted for processing

RESUMO Objetivo Avaliar a citotoxicidade de produtos submetidos à contaminação desafio, limpeza baseada em procedimento operacional padrão (POP) validado e enxágue final em diferentes tipos de água: de torneira, deionizada, destilada, tratada por osmose reversa e ultrapurificada. Método Estudo experimental e laboratorial. Foram utilizadas como amostras 130 cânulas de hidrodissecção, 26 por grupo experimental, caracterizados, de acordo com a água utilizada no último enxágue. As amostras foram submetidas à contaminação desafio interna e externamente por uma solução contendo 20% sangue de carneiro desfibrinado e 80% de Cloreto de Sódio a 0,9%. Em seguida, tiveram o lúmen preenchido por solução viscoelástica, permanecendo em contato com o contaminante por 50 minutos, sendo então, processadas, de acordo com um POP validado. A citotoxicidade foi avaliada pela captura do corante vital vermelho neutro. Resultados Ausência de citotoxicidade nos extratos das amostras. Conclusão As amostras não demonstraram citotoxicidade, independentemente da qualidade de água utilizada no último enxágue. Os resultados apresentados puderam ser alcançados unicamente por meio do uso de um procedimento operacional padrão de limpeza validado, baseado em literatura científica, em recomendações oficiais e na legislação relacionada.

RESUMEN Objetivo Evaluar la citotoxicidad de productos sometidos a contaminación desafío, limpieza siguiendo procedimiento validado y enjuague en diferentes tipos de agua: de caño, desionizada, destilada, tratada por ósmosis inversa y ultrapurificada. Método fueron utilizados 130 canulas de hidrosección, 26 por grupo experimental, caracterizadas por el tipo agua utilizada en el último enjuague. La muestras fueron contaminadas interna y externamente por una solución con 20% sangre de carnero desfibrinado y 80% de Cloruro de Sodio a 0,9%. Luego el lumen fue cubierto por la solución viscoelastica, permaneciendo en contacto con el contaminante 50 minutos y posteriormente procesados, siguiendo orientaciones del procedimiento padrón validado. El ensayo de citotoxicidad se realizó mediante la incorporación del colorante vital rojo neutro. Resultados ausencia de toxicidad en extractos de las muestras. Conclusión no hubo toxicidad en las muestras, independiente del agua utilizada en el último enjuague. Los resultados fueron alcanzados gracias al uso del procedimiento operacional padrón de limpieza validado, embasado en literatura científica, recomendaciones oficiales y en legislación relacionada.

ABSTRACT Objective To assess the cytotoxicity of products subsequent to a cleaning process based on a validated standard operating procedure (SOP), and a final rinse with different types of water: tap, deionized, distilled, treated by reverse osmosis and ultra-purified. Method This was an experimental and laboratory study. The sample consisted of 130 hydrodissection cannulas, 26 per experimental group, characterized according to type of water used in the final rinse. The samples were submitted to internal and external contamination challenge with a solution containing 20% defibrinated sheep blood and 80% of sodium chloride 0.9%. Next, the lumens were filled with a ophthalmic viscosurgical device, remaining exposed for 50 minutes, and then were processed according to the validated SOP. Cytotoxicity was assessed using neutral red uptake assay. Results No cytoxicity was detected in the sample extracts. Conclusion The samples did not display signs of cytotoxicity, regardless of final rinse quality. The results obtained were reached by using only a validated cleaning operating procedure, based on the scientific literature, and on official recommendations and related regulation.

An alternative to never repair using an antioxidant compound: a histological study in rats

The fascicular composition and organisation of the inferior alveolar nerve (IAN) were determined to confirm the microarchitecture of the IAN bundles into each of the mandibular teeth, including the composition of the mental nerve. The aim of this study was to evaluate peripheral nerve repair after the application of an antioxidant compound to the damaged nerve tissue to elevate the concentration and bioavailability of elements capable of favouring tissue repair. Twenty-five Wistar rats were divided into groups: The Control 1 (Ctl 1) (n = 5) animals had the ischiatic nerve exposed with no suture injury and were sacrificed at 30 days post-operatively. The Control 2 (Ctl 2) (n = 10) animals had the ischiatic nerve exposed, and the nerve was injured using suture in three distinct regions. In the experimental (Exp) animals (n = 10), an antioxidant organic compound was applied to the nerve injury site...(AU)

Citotoxicidade de tubos de PVC esterilizados em óxido de etileno após exposição à radiação gama / Cytotoxicity of PVC tubes sterilized in ethylene oxide after gamma radiation exposure / Citotoxicidad de tubos de PVC esterilizados en óxido de etileno luego de exposición a la radiación gamma

Materiais esterilizados em raios gama, ao serem re-esterilizados em óxido de etileno (EO), formam substâncias tóxicas? Esta questão norteou o objetivo deste estudo, que foi investigar o potencial efeito citotóxico do PVC esterilizado em radiação gama e re-esterilizado em EO pelo método da difusão em ágar em culturas celulares. Nove tubos de PVC foram submetidos à esterilização em radiação gama e re-esterilizados em EO. Os tubos foram divididos em um total de 81 unidades de análise, que foram testadas de forma a representar as superfícies internas, externas e massa de cada tubo. Concluiu-se que os materiais de PVC esterilizados em Radiação Gama e consecutivamente re-esterilizados em EO não são citotóxicos.

Do materials sterilized using gamma rays become toxic when re-sterilized in ethylene oxide? This question guided the objective of this study, which was to investigate the potential cytotoxic effect of PVC sterilized by gamma radiation and re-sterilized with EO by the agar diffusion method in cell cultures. Nine PVC tubes were subjected to gamma radiation sterilization and were re-sterilized in EO. The tubes were divided into a total of 81 units of analysis that were tested so as to represent the internal and external surfaces and mass of each tube. It was concluded that the PVC materials sterilized in gamma radiation and re-sterilized in EO are not cytotoxic.

Los materiales esterilizados con rayos gama, al ser re-esterilizados en óxido de etileno (EO), ¿forman substancias tóxicas? Esta pregunta orientó el objetivo del presente estudio, que fue investigar el potencial efecto citotóxico del PVC esterilizado en radiación gamma y re-esterilizado en EO por el método de difusión en agar en cultivos celulares. Nueve tubos de PVC fueron sometidos a esterilización por radiación gamma y re-esterilizados en EO. Se les aplicaron en total 81 unidades de análisis, las cuales fueron testeadas de manera tal de representar las superficies internas, externas y la masa de cada tubo. Se concluyó en que los materiales de PVC esterilizados con Radiación Gamma y, posteriormente, con EO, no son citotóxicos.

Cytotoxicity of cannulas for ophthalmic surgery after cleaning and sterilization: evaluation of the use of enzymatic detergent to remove residual ophthalmic viscosugical device material

PURPOSE: To evaluate the cytotoxicity of reusable cannulas for ophthalmic surgery after the cannulas were filled with an ophthalmic viscosurgical device (OVD) and cleaned with an enzymatic detergent. SETTING: Microbiological Testing Laboratory, Department of Medical-Surgical Nursing, University of S~ao Paulo School of Nursing, and Cell Culture Section, Adolfo Lutz Institute, S~ao Paulo, Brazil. DESIGN: Experimental study. METHODS: The sample consisted of 30 reusable 25-gauge injection cannulas, 20.0 mm in length, whose lumens were filled with an OVD solution for 50 minutes. The following steps were used to process the cannulas: (1) presoaking, (2) washing the lumen using a high-pressure water jet, (3) backwashing with enzymatic detergent in ultrasonic cleaner, (4) preliminary rinsing with tap water, (5) final rinsing with sterile distilled water, (6) drying with compressed filtered air, (7) wrapping in surgical-grade paper, and (8) steam sterilization at 134C for 4 minutes. The cannulas were then tested for cytotoxicity according to the United States Pharmacopeia 32. RESULTS: The cleaning protocol used in this study removed residues of OVD solution and enzymatic detergent as shown by the lack of cytotoxicity of all sample extracts. CONCLUSION: This cleaning protocol has the potential to minimize the occurrence of toxic anterior segment syndrome associated with residues of OVD solutions and enzymatic detergents. Financial Disclosure: No author has a financial or proprietary interest in any material or method mentioned.

Padronização da técnica de eletroforese de isoenzimas para certificação de linhagens celulares / Standardization of isoenzymes electrophoresis technique for cell lines certification

A comprovação da espécie de origem é um dos itens da certificação de linhagens celulares, que pode ser feita por meio de técnica de eletroforese de isoenzimas. Com o objetivo de padronizar essa técnica, o grupo de estudo do Núcleo de Cultura de Células do IAL utilizou extratos celulares de diferentes espécies animais, que foram submetidos à eletroforese horizontal ou vertical em géis de poliacrilamida ou agarose, 100 V e4 oC. A revelação das bandas para a enzima glicose 6-fosfato desidrogenase foi realizada com o auxílio de sais de tetrazólio. Observou-se a presença de uma única banda para cada linhagem celular testada, com os padrões de migração esperados para as diferentes espécies utilizadas, com exceção da linhagem bovina MDBK, que não apresentou uma das bandas, provavelmente em função de menor expressão dessa enzima. Após a avaliação dos resultados obtidos com os diferentes sistemas de eletroforese e géis testados, optou-se pelo uso de eletroforese horizontal em géis de agarose a 2. A padronização e a implantação dessa técnica permitirão que o laboratório forneça linhagens celulares com o devido controle de qualidade.

Estudo da toxicidade in vivo e in vitro em produtos de papel para fins sanitários e sua avaliação microbiológica / Study the toxicity in vivo and in vitro in papers with sanitary purposes and microbiological quality assessment

Os papéis para fins sanitários são produtos absorventes compostos de fibras naturais, destinados à fabricação de papel higiênico, lenços, toalhas, guardanapos e lençóis hospitalares. Foram analisados 65 produtos de diferentes marcas de papéis comercializadas em São Paulo para avaliar a toxicidade dérmica utilizando-se ensaios in vivo e in vitro e a qualidade microbiológica. Foram utilizados ensaios recomendados pelas Norma ABNT NBR 15134-30/09/2004, Portaria 1480-31/12/1990 e Farmacopeia Americana. O ensaio in vivo foi realizado utilizando-se técnicas de Draize, Magnusson e Kligman; para o teste in vitro pela difusão em ágar foram empregadas as linhagens celulares NCTC clone 929 (ATCC-CCL1). Os produtos apresentaram resultados satisfatórios nos ensaios in vivo e in vitro. A qualidade microbiológica foi satisfatória em 49 (75,4%) amostras, porém em 16 (24,6%) amostras os resultados foram insatisfatórios pela presença de bactérias mesófilas aeróbias e de Clostridium spp. A técnica de citotoxicidade in vitro poderá ser utilizada como teste de triagem e como ensaio alternativo em substituição aos ensaios in vivo. Apesar da análise microbiológica não constar nas normas vigentes, o seu uso torna-se relevante para avaliar as condições higiênico-sanitárias e atender às normas de Boas Práticas de Fabricação e Controle.

Papers manufactured for sanitary purposes are absorbing products, composed by natural fibers, and usedto produce hygienic paper, handkerchiefs, towels, napkins, and hospital sheets. Sixty-five products fromdifferent manufacturers and marketed in São Paulo, Brazil were investigated by in vivo and in vitro dermal toxicity assays and microbiological quality analysis. The assays were performed following ABNT NBR 15134 Regulation and Ministerial Decree 1480. In vivo assay was carried out by Draize and Magnusson and Kligman techniques, and in vitro testing was performed by agar diffusion NCTC cell strains clone 929(ATCC-CCL1). Microbiological analysis was performed according to Ministerial Decree 1480. The analyzed products showed satisfactory results on both in vivo and in vitro assays. Forty-nine (75.4%) samples showed satisfactory microbiological quality, but unsatisfactory in 16 (24.6%) samples due to the occurrence of aerobicmesophilic bacteria and Clostridium spp. In vitro cytotoxicity assay could be used as screening test, and as an alternative test for replacing the animal-using methodologies. The microbiological analysis is not included in the pertinent guidelines, but the use of analytical marker is crucial for assessing the sanitary-hygienic conditions and also to act in compliance with Good Manufacturing and Control Practices.

Determinação da segurança biológica do xampu de cetoconazol: teste de irritação ocular e avaliação do potencial de citotoxicidade in vitro / Determination of the biological reactivity of ketoconazole in shampoo: draize eye test and cytotoxity test

Cetoconazol é um agente antifúngico, que pode ser incorporado em diferentes formas farmacêuticas, como, por exemplo, xampus e cremes. O objetivo do trabalho foi avaliar a segurança biológica in vivo (teste de irritação ocular) e in vitro (teste de citotoxicidade) do xampu de cetoconazol degradado sob ação da luz. Para tanto, a formulação foi exposta à radiação UV-C (254 nm) e foram empregados dois métodos para a determinação quantitativa do cetoconazol: CLAE e ensaio microbiológico. Os resultados demonstraram alteração do cetoconazol em presença da luz - presença de picos secundários no cromatograma e diminuição da atividade antifúngica - entretanto, não demonstraram alteração na segurança biológica entre xampu de cetoconazol e xampu de cetoconazol contendo produtos de degradação.

Ketoconazole is an antifungal agent and can be incorporated into several dosage forms, as an example it could be mentioned shampoos and creams. The aim of this work was to assess the biological reactivity in vivo (Draize eye test) and in vitro (cytotoxity test) of ketoconazole in shampoo degradeted under action of light. The formulation was exposed to UV-C (254 nm) radiation and two methods were used for the quantitative determination of ketoconazole: HPLC and microbiological assay. The results showed alteration in ketoconazole in presence of light - secondary peaks in chromatogram and decrease in antifungal activity - however, no alteration on the biological reactivity between ketoconazole shampoo and ketoconazole shampoo containing degradation products was observed.

Avaliação da biocompatibilidade de implantes mamários de silicone esterilizados por calor seco e pelo óxido de etileno / Biocompatibility assessment of silicone gel breast implants sterilized by dry-heat and by ethylene oxide

Os implantes mamários de silicone têm sido empregados, tanto nas cirurgias de aumento de mama, quanto na reconstrução do tecido mamário. A segurança biológica deste tipo de implante deve ser garantida, pois, em função da esterilização estes materiais, podem sofrer alterações oriundas dos processos esterilizantes por comprometimento da estrutura química dos polímeros. O objetivo deste trabalho consistiu na avaliação da biocompatibilidade de implantes mamários preenchidos com gel de silicone, de superfície lisa e texturizada submetidos à esterilização por calor seco e óxido de etileno. Empregou-se, para tanto, método in vitro, avaliando a citotoxicidade pelo método de captura do vermelho neutro, utilizando a linhagem celular NCTC clone 929. Os resultados obtidos demonstraram não haver comprometimento da biocompatibilidade dos biomateriais submetidos aos dois processos (calor seco e óxido de etileno), assim como comprovaram a eficácia de ambos na esterilização dos implantes

Silicone breast implants have been widely used for mammary augmentation and reconstruction surgery. Biological safety of these implants can be altered by sterilization methods. This study consisted of the biocompatibility assessment of smooth and textured silicone gel breast implants sterilized by dry-heat and ethylene oxide through cell viability, employing neutral red uptake method. The NCTC clone 929 cell were employed and the results showed no cytotoxicity of implants after both sterilization processes

Investigation of influenza in migrating birds, the primordial reservoir and transmitters of influenza in Brazil

Os mais importantes reservatórios do vírus influenza são os pássaros. A manutenção do vírus influenza em hospedeiros naturais, inclusive o homem, permite que esse vírus realize rearranjos entre as suas cepas. O recente relato de uma cepa influenza aviária A(H5N1), em humanos, se deu em uma criança com doença respiratória fatal, na China em 1977. O presente estudo foi conduzido para elucidar o transporte da influenza por pássaros que migram, anualmente, através de ambos hemisférios o do Norte e do Sul, com especial atenção voltada à espécies Vireo olivaceo [Juruviara(BR) e Red-eyed vireo(USA)] que viaja do USA para o Brasil, e vice-versa, e a espécie Elaenia mesoleuca [Tuque(BR) e (USA)] que voa por todo o Hemisfério Sul. Essas espécies de pássaros, que residem e migram em São Paulo, e que demonstram transportar o vírus influenza, foram selecionadas. As partículas virais isoladas foram observadas por microscópio eletrônico. O vírus influenza foi detectado pelos testes: House Duplex/PCR e Gloria. Os resultados revelam que os pássaros das espécies: Elaenia mesoleuca e Vireo olivaceus são transportes do vírus influenza enquanto cruzam ambos Hemisférios. Para o conhecimento da função que os pássaros migratórios podem desempenhar na epidemia de influenza, no Brasil, caracterização dos subtipos deste vírus estão sendo realizados.

Human vaccinia-like virus outbreaks in São Paulo and Goiás States, Brazil: virus detection, isolation and identification

A partir de outubro de 2001, o Instituto Adolfo Lutz tem recebido amostras de líquido vesicular e crostas de lesões de pele de pacientes das regiões do Vale do Paraíba, Estado de São Paulo e do Vale do São Patricio, Estado de Goiás. Os dados clínicos e epidemiológicos sugeriam que os surtos poderiam ser causados por Cowpox virus ou Vaccinia virus. A maioria dos pacientes era ordenhadores que tinham lesões vesicopustulares nas mãos, braços, antebraços e alguns na face. A análise por microscopia eletrônica direta (MED) detectou partículas com morfologia de vírus do gênero Orthopoxvirus em amostras de 49 (66,21%) pacientes dos 74 analisados. Os vírus foram isolados em membrana corioalantóide (MCA) de ovo embrionado de galinha e em linhagem celular Vero com confirmação por MED e PCR. Das 21 amostras de lesões submetidas ao PCR utilizando iniciadores para o gene da hemaglutinina (HA), 19 foram positivas. A digestão por enzima de restrição TaqI resultou em quatro fragmentos característicos de Vaccinia virus. A análise nucleotídica do seqüenciamento revelou que esses vírus apresentam 99,9% de similaridade com o Cantagalo virus, descrito como uma cepa de Vaccinia virus, havendo apenas alteração de um nucleotídeo na posição 616 com mudança de um aminoácido na proteína na posição 206. A análise filogenética mostrou que os isolados se agruparam junto aos Cantagalo virus, outras cepas de Vaccinia virus e Rabbitpox virus.

Testes in vitro como alternativa aos testes in vivo de Draize / In vitro tests used as an alternative to Draize in vivo tests

Os procedimentos descritos por Draize deram origem aos testes de irritação ocular e cutânea adotados internacionalmente para avaliar produtos e substâncias. Entretanto, eles são criticados por motivos éticos, devido a crueldade com os animais, mesmo após diferentes modificações terem sido propostas nos protocolos originais. Metodologias alternativas têm sido estudadas para avaliar a toxicidade de produtos usados em seres humanos. Entre as mais citadas encontram-se as que utilizam organismos inferiores, células vivas de mamíferos, sistemas organotípicos e substâncias inertes, além de bancos de dados informatizados e programas que avaliam a toxicidade pela determinação de relação estrutura-atividade. Os métodos utilizando células vivas têm sido muito utilizados para predizer com segurança a irritação, contribuindo para a redução do número de animais utilizados nos testes in vivo. Até o momento, não existem métodos validados para substituir os ensaios de irritação ocular e cutânea, mas somente para avaliar substâncias corrosivas

Occurrence of influenza B/Hong Kong-Like strains in Brazil, during 2002

Through the influenza virus surveillance from January to October 2002, influenza B/Hong Kong-like strains circulating in the Southeast and Centre East regions of Brazil have been demonstrated. This strain is a variant from B/Victoria/02/88 whose since 1991 and until recently have been isolated relatively infrequently and have been limited to South-Eastern Asia. A total of 510 respiratory secretions were collected from patients 0 to 60 years of age, with acute respiratory illness, living in the Southeast and Centre East regions of Brazil, of which 86 (17.13 percent) were positive for influenza virus. Among them 12 (13.95 percent) were characterized as B/Hong Kong/330/2001; 3 (3.49 percent) as B/Hong Kong/1351/2002 a variant from B/Hong Kong/330/2001; 1 (1.16 percent) as B/Sichuan/379/99; 1 (1.16 percent) as B/Shizuoka/5/2001, until now. The percentages of cases notified during the surveillance period were 34.88 percent, 15.12 percent, 15.12 percent, 4.65 percent, 15.12 percent, 13.95 percent, in the age groups of 0-4, 5-10, 11-15, 16-20, 21-30, 31-50, respectively. The highest proportion of isolates was observed among children younger than 4 years but serious morbidity and mortality has not been observed among people older than 65 years, although B influenza virus component for vaccination campaign 2002 was B/Sichuan/379/99 strain. This was probably due to the elderly protection acquired against B/Victoria/02/88. In addition, in influenza A/Panama/2007/99-like (H3N2) strains 22 (25.58 percent) were also detected, but influenza A(H1N1) has not been detected yet

Teste de citotoxicidade in vitro como alternativa ao teste in vivo de Draize na avaliação de produtos cosméticos / Citotoxicity test in vitro as an alternative in vivo test of Draize in the evaluation of cosmetic products

Os procedimentos descritos por Draize são a base dos testes de irritação ocular e cutânea adotados internacionalmente para avaliar produtos e substâncias. Entretanto, eles têm sido criticados por motivos éticos, devido à crueldade com os animais e, por isso, metodologias alternativas têm sido estudadas para avaliar a toxicidade de produtos que entram em contato com o ser humano. Sendo assim, um estudo comparativo foi realizado entre testes de irritação ocular, cutânea e mucosa oral usando coelhos e testes in vitro pelos métodos de difusão em ágar e de captura do vermelho neutro, ambos usando as linhagens celulares NCTC clone 929, FPC-IAL e SIRC. Os cosméticos avaliados foram batons, bases faciais, pós compactos, blushes, sombras para os olhos, máscaras para os cílios, lápis ou delineadores para os olhos, e sabonetes líquidos de uso adulto e infantil...

Identificação das espécies de roedores reservatórios de hantavírus no sul e sudeste brasileiro: (Nota Prévia) / Identification of hantavirus rodent reservoirs species in south and southeastern Brazil: (Previous Note)

BACKGROUNS: Hantavirus is a genus belonging to the Bunyaviridae family. Human infection occurs mainly by inhalation of aerosols formed from wild rodent droppings. The objectives of this study were to identify the species of rodent reservoirs of hantavirus that cause the cardiopulmonary syndrome in the southern and southeastern regions of Brazil; to understand the eco-epidemiology of this virus and the wild rodents' systematics. MATERIAL AND METHODS: Rodents were captured using Sherman traps distributed throughout natural environments and around human settlements in localities were hantavirus cardiopulmonary syndrome was detected. After species identification, biometric measures were taken of each animal. Samples of blood, liver, kidney, spleen, heart and lung were preserved in liquid nitrogen and sent to the laboratory. Blood samples were tested for IgG antibodies for hantavirus using an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Voucher specimens are available at the Instituto Adolfo Lutz collection. RESULTS: A total of 4,069 rodents, belonging to 22 species, were captured. From these rodents, 201 had IgG antibodies for hantavirus. The number of positive specimens per number of captured rodents according to the natural environments studied is the following: a) Mainland: Bolomys lasiurus (130/1187), Oximicterus ruttilans (1/6), Thalpomys lasiotis (0/2), Oligoryzomys stramineus (0/1), Oryzomys nitidus (0/24), Pseudoryzomys simplex (0/14), Calomys tener (22/910), Calomys callosus (2/107); b) Atlantic rainforest: Bolomys sp (1/51), Brucepattersonius soricinus (0/16), Oximicterus quaestor (0/15), Thaptomys nigrita (1/59), Delomys dorsalis (0/1), Delomys sublineatus (0/4) Oligoryzomys delticola (0/5), Oryzomys capito (0/3), Oryzomys ratticeps (0/7), Calomys laucha (0/26); c) Both habitats: Akodon sp (14/910), Oligoryzomys nigripes (28/360), Rattus rattus (0/9), Mus musculus (2/352). Oligoryzomys nigripes was more frequent in the Atlantic rainforest. Bolomys lasiurus showed the highest capture index (44%) and the highest antibody prevalence among mainland species (10.9%). In the Atlantic rainforest, Akodon sp was the most captured species (45,4%) and Oligoryzomys nigripes showed the highest antibody prevalence (7,8%). CONCLUSIONS:Antibody prevalence indicates Bolomys lasiurus as the reservoir of hantavírus in the mainland regions of São Paulo and Minas Gerais and Oligoryzomys nigripes in the Atlantic rainforest of São Paulo, Rio Grande do Sul, Paraná and Santa Catarina. Species belonging to the genus Akodon and Calomys showed lower prevalence, and complementary studies are needed to clarify their role in hantavirus epidemiology.

DELINEAMENTO DO PROBLEMA: Os hantavirus formam um gênero da família Bunyaviridae . A infecção humana ocorre, principalmente, pela inalação de aerossóis formados a partir de excretas de roedores silvestres infectados. Os objetivos deste trabalho foram identificar as espécies de roedores reservatórios de hantavírus causadores de síndrome cardiopulmonar nas regiões Sul e Sudeste do Brasil; e compreender a ecoepidemiologia desses vírus e a sistemática de roedores silvestres. MATERIAL E MÉTODOS: Em locais onde ocorreram casos de síndrome cardiopulmonar por hantavírus, foram realizadas capturas de roedores silvestres com auxílio de armadilhas tipo Sherman, distribuídas nos diversos biomas e ambientes domiciliares, peridomiciliares e silvestres. Após identificação sistemática da espécie, medidas biométricas foram tomadas de cada animal. Amostras de sangue, fígado, rim, baço, coração e pulmão foram conservadas em nitrogênio líquido e levadas para o laboratório. O sangue foi testado pela técnica imunoenzimática (ELISA) para detecção de anticorpos IgG para hantavírus. As carcaças dos roedores foram depositadas na coleção do Instituto Adolfo Lutz. RESULTADOS: Foram capturados 4.069 roedores, de 22 espécies. Desses, 201 roedores apresentaram anticorpos IgG para hantavírus. As espécies e os respectivos números de roedores positivos por capturados, de acordo com os biomas estudados foram: a) cerrado: Bolomys lasiurus (130/1187), Oximicterus ruttilans (1/6), Thalpomys lasiotis (0/2), Oligoryzomys stramineus (0/1), Oryzomys nitidus (0/24), Pseudoryzomys simplex (0/14), Calomys tener (22/910), Calomys callosus (2/107), b) Mata Atlântica: Bolomys sp (1/51), Brucepattersonius soricinus (0/16), Oximicterus quaestor (0/15), Thaptomys nigrita (1/59), Delomys dorsalis (0/1), Delomys sublineatus (0/4) Oligoryzomys delticola (0/5), Oryzomys capito (0/3), Oryzomys ratticeps (0/7), Calomys laucha (0/ 26); c) nos dois biomas: Akodon sp (14/910), Oligoryzomys nigripes (28/360), Rattus rattus (0/9), Mus musculus (2/352). Oligoryzomys nigripes foi consideravelmente mais freqüente na mata atlântica. Bolomys lasiurus apresentou maior índice de captura (44%) e de prevalência de anticorpos entre espécies de cerrado (11%), enquanto na mata atlântica, Akodon sp foi a mais capturada (45%) e Oligoryzomys nigripes apresentou maior soropositividade (8%). CONCLUSÕES: Baseando-se na prevalência de anticorpos, Bolomys lasiurus foi identificado como reservatório de hantavírus nas regiões de cerrado de São Paulo e Minas Gerais e Oligoryzomys nigripes nas regiões de mata atlântica de São Paulo, Rio Grande do Sul, Paraná e Santa Catarina. Espécies do gênero Akodon e Calomys mostraram baixas soroprevalências e requerem novos estudos para esclarecer seu papel na epidemiologia do hantavírus.

Outbreak of influenza type A (H1N1) in Iporanga, Säo Paulo State, Brazil

From June to July 1999 an outbreak of acute respiratory illness occurred in the town of Iporanga. Out of a total of 4,837 inhabitants, 324 cases were notified to the Regional Surveillance Service. Influenza virus was isolated from 57.1 percent of the collected samples and 100 percent seroconversion to influenza A (H1N1) was obtained in 20 paired sera tested. The isolates were related to the A/Bayern/07/95 strain (H1N1). The percentages of cases notified during the outbreak were 28.4 percent, 29.0 percent, 20.7 percent, 6.2 percent and 15.7 percent in the age groups of 0-4, 5-9, 10-14, 15-19 and older than 20 years, respectively. The highest proportion of positives was observed among children younger than 14 years and no cases were notified in people older than 65 years, none of whom had been recently vaccinated against influenza. These findings suggest a significant vaccine protection against A/Bayern/7/95, the H1 component included in the 1997-98 influenza vaccine for elderly people. This viral strain is antigenically and genetically related to A/Beijing/262/95, the H1 component of the 1999 vaccine. Vaccines containing A/Beijing/262/95 (H1N1) stimulated post-immunization hemagglutination inhibition antibodies equivalent in frequency and titre to both A/Beijing/262/95-like and A/Bayern/7/95-like viruses. Thus, this investigation demonstrates the effectiveness of vaccination against influenza virus in the elderly

Comparaçäo de métodos para testar a citotoxicidade "in vitro" de materiais biocompatíveis / Comparison of methods to test an \"in vitro\" test of cytotoxicity of biocompatible hospital materials

Comparar a sensibilidade do método de difusäo em ágar e do método de extraçäo utilizando as linhagens celulares RC-IAL (células fibroblásticas de rim de coelho) e HeLa (células epiteliais de carcinoma do colo do útero humano), na avaliaçäo da citotoxidade "in vitro" de materiais de uso médico-hospitalar. Foram testadas 50 amostras escolhidas por sorteio, entre as já conhecidamente positivas e negativas e identificadas como: algodäo, espuma, borracha, latéx, celulose e acrílico. Além, das amostras citadas foram testadas experimentalmente várias concentraçöes de SDS (duodecil sulfato de sódio) nas culturas celulares RC-IAL e HeLa. Das 50 amostras testadas, 44 (88 por cento) foram positivas para os dois métodos. Mas quanto comparado o SDS nos dois métodos foram observados resultados positivos nas concentraçöes de 0,5 a 0,05 ug/ml no método de difusäo em ágar e no método de extraçäo somente foi observado efeito citotóxico até a concentraçäo de 0,25 ug/ml. Os resultados encontrados säo similares aos observados por outros autores que testaram materiais com, por exemplo, ligas metálicas. Quando foi usado o SDS observou-se, nas duas linhagens celulares, diferenças favoráveis ao método de difusäo em ágar em duas concentraçöes, isto é, a sensibilidade deste método foi significantemente maior, por inspecçäo, em relaçäo ao método de extraçäo, além de se constituir em método mais simples de ser realizado

Raios gama e óxido de etileno II: esterilizaçöes incompatíveis? (Análise piloto) / Gamma rays and ethylene oxide II: incompatible sterizations?

Análises foram feitas em objetos usados na prática diária hospitalar - luvas de látex e fios cirúrgicos - expostos a dois processos de esterilizaçäo subsequentes, quais sejam: radiaçäo gama e óxido de etileno. O objetivo foi o de verificar se a exposiçäo dos materiais aos dois processos de esterilizaçäo provocava a retençäo de resíduos tóxicos a culturas celulares.Foram realizadas análises em culturas celulares para detecçäo da toxidade in vitro, pelo método de difusäo em ágar, com linhagens celulares RC-IAL e HeLa. Constatou-se nas luvas, a presença de efeitos citotóxicos nas amostras originais, como haviam sido recebidas dos fabricantes, e, nas amostras submetidas aos dois processos de esterilizaçäo. Nos fios cirúrgicos, os testes revelaram que o halo de citotoxidade presente nas amostras originais, näo foi encontrado nas amostras que haviam sido expostas aos dois processos de esterilizaçäo. Através deste estudo piloto, demonstrou-se que o processo de esterilizaçäo parece näo provocar presença de resíduos tóxicos nos materiais enviados para o estudo.

Growth and maintenance of Aedes Albopictus cell line, clone C6/36, in different media

The sensitivity of Aedes albopicts cell line, clone C6/36, to arbovirus isolation and growth has been being shown by several authors. The present work has verified which, among several media under the same conditions, would be the most efficient one for C6/36 cultivation and viral isolation. The L-15 medium has proved to be the best among others (MEM,DMEM and 199) with the quickest viral isolation(DEN-1). Also, in this medium, the samples could be observed until the 14th day, without significative cellular death. The results reccommend L-15 medium as the most efficient and economic one for the purposes